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Comparación entre los tipos de proteinuria en una población pediátrica  
ARTÍCULO ORIGINAL  
Comparación entre los tipos de proteinuria  
en una población pediátrica  
Factorovich, A.M.  
Laboratorio de Química Clínica, Laboratorio Central, Hospital de Niños Dr. Ricardo Gutiérrez. CABA, Argentina.  
Contacto: Factorovich A. M.; adrifactor@yahoo.com.ar  
RESUMEN  
La proteinuria es un dato relevante en el diagnóstico y seguimiento de la enfermedad renal. Las  
de origen renal pueden ser causadas por defectos a nivel glomerular, tubular, mixtos o mielomato-  
sas. La manera de identificar cada uno de estos perfiles proteicos es por el Uroproteinograma, método  
cualitativo que permite, mediante una corrida electroforética, separar las proteínas presentes en la  
orina. Este método puede variar su sensibilidad cambiando los soportes de corrida y los colorantes  
utilizados. La b microglobulina es una proteína marcadora de daño tubular. Comparar los tipos de  
2
proteinuria visualizados en uroproteinogramas, realizados en una población pediátrica, utilizando dos  
soportes: agarosa con coloración de plata coloidal y dodecilsulfato de sodio-Agarosa coloreado con  
violeta acido, y evaluar cuales nos brindan mayor información sobre el daño renal. Evaluar si el dosaje  
de b microglobulina es un método confirmatorio para la proteinuria de tipo tubular. Se analizaron 38  
2
muestras de orina de 24 hs. sin concentrar, que llegaron durante un año al laboratorio central del  
Hospital de Niños “Dr. Ricardo Gutiérrez” con pedido de uroproteinograma. Estos se realizaron por una  
técnica con soporte de dodecilsulfato de sodio-Agarosa coloración violeta acido y otra con soporte  
agarosa con coloración de plata coloidal. Para ambos métodos se emplearon kits comerciales. Con-  
juntamente al uroproteinograma se realizó en 27 de las 38 muestras recibidas, un enzimoinmunoen-  
sayo de micro partículas, para el dosaje de b2 microglobulina. Cuando se trabajó con dodecilsulfato  
de sodio- agarosa se observó un aumento en los patrones fisiológicos, tubulares y mixtos, y una dis-  
minución de los patrones glomerulares respecto al otro método. La b microglobulina mostro valores  
2
elevados en 12 de las 27 muestras analizadas de las cuales sólo el 67 % se asoció con patrón tubular  
o mixto cuando se empleó agarosa con coloración de plata. Cuando se utilizó dodecilsulfato de sodio  
-
agarosa el 100 % presentó estos patrones. Un 20 % de las 15 muestras, con valor de b microglobulina  
2
dentro del rango de referencia, presentaban proteinuria tubular o mixta cuando se utilizó dodecilsulf-  
ato de sodio -agarosa. El dodecilsulfato de sodio -agarosa resultó ser una herramienta fundamental  
para el diagnostico de las proteinurias en especial las tubulares, pudiendo diferenciar entre completas  
e incompletas. El dosaje de b microglobulina no resultó en todos los casos ser un método confirma-  
2
torio de la tubulopatía, ya que en un 20 % de los casos se obtuvieron valores normales por presentar  
tubulopatías incompletas (presencia de a1 microglobulina).  
Palabras clave: uroproteinograma, dodecilsulfato de sodio-agarosa, coloración de plata, b microglob-  
2
ulina.  
Proteinuria is an important piece of information for the diagnosis and follow up of renal disease.  
Those ones of renal origin may be caused by defects in glomerular, tubular, mixed and myeloma  
causes level. How to identify each one of these protein profiles is through the use of urinary protein  
electrophoresis, a qualitative method which allows, by electrophoretic run, to separate the proteins  
present in the urine. By changing run supports and the used dyes, sensitivity of this method may be  
varied. The b2 microglobulin is a tubular injury marker protein. To compare the types of proteinuria  
observed in uroproteinogramas performed in a pediatric population, using two different techniques: a)  
agarose colloidal silver staining and; b) sodium dodecyl sulfate - agarose, and to evaluate which one  
gives us more information about kidney damage. Evaluate if the measure of b2 microglobulin, confirm  
the tubular proteinuria. Thirty-eight samples of 24 hours unconcentrated urine were analyzed, which  
arrived during one year to the Central Llaboratory at Children’s Hospital “Dr Ricardo Gutierrez” with  
order to urinary protein electrophoresis. Those ones were performed by using sodium dodecyl sulfate  
ABSTRACT  
ByPC 2015;79(1):16-20  
Comparación entre los tipos de proteinuria en una población pediátrica  
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agarosa technique and agarose gel with colloidal silver staining. Commercial kits were used for both  
methods. Along with the urinary protein electrophoresis, a micro particle enzyme immunoassay was  
performed in 27 of the 38 received samples, for the assay of b2 microglobulin. Comparing the two  
methods, working with sodium dodecyl sulphate agarose, it were observed an increase in physiological,  
tubular and mixed patterns, and a decrease in glomerular patterns. The b2 microglobulin showed  
elevated values in 12 of the 27 analyzed samples of which, 67 % was only associated with tubular or  
mixed pattern when using agarose with silver staining. When sodium dodecyl sulfate -agarose was  
used, 100 % of samples presented these patterns. When using sodium dodecyl sulfate –agarose, 20 %  
of the 15 samples with normal value of b2microglobulina showed mixed or tubular proteinuria. Sodium  
dodecyl sulfate -agarose proved to be an essential tool for the diagnosis of proteinurias, specially the  
tubular ones, allowing to differentiate between completed and incomplete ones. The b2 microglobulin  
ISSN 1515-6761 Ed. Impresa  
ISSN 2250-5903 Ed. CD-ROM  
Código Bibliográfico: RByPC assay did not prove in all cases, to be a confirmatory method for the tubulopathy, since normal values  
Fecha de Recepción:  
were obtained on 20 % of cases due to incomplete tubulopathies (presence of a1 microglobulin).  
Key words: urinary protein electrophoresis, Sodium dodecyl sulfate -agaroseolloidal silver staining, b2  
microglobulin.  
2
0/05/2014  
Fecha de Aceptación:  
6/05/2014  
.
2
Introducción  
corrida electroforética. Si la separación es por carga eléctri-  
La proteinuria es uno de los datos más relevantes en el ca cada banda esta constituida por un grupo de proteínas,  
diagnostico y seguimiento de la enfermedad renal. En nu- alguna de ellas de origen tubular y otras glomerular. Por  
merosas ocasiones es un hallazgo de laboratorio de gran este motivo es necesaria una persona entrenada para una  
utilidad para la intervención médica.  
correcta interpretación del resultado (Fig. 1).  
Se la puede clasificar en fisiológica, transitoria, intermi-  
Las técnicas pueden realizarse en forma manual o au-  
tente y persistente. Esta última es la más importante desde tomatizada.  
el punto de vista clínico. Según su origen pueden ser prerre-  
La muestra de orina que se utiliza para el Uroproteino-  
nales, también llamadas overflow; renales, que pueden ser grama es de 24 horas ya que la excreción de las diferentes  
causadas por defectos a nivel glomerular, tubulares o mix- fracciones proteicas no es pareja a lo largo del día, depen-  
1
,2,3,4,5  
tos, y las postrenales  
.
diendo esta del ejercicio, ingesta, hidratación, y otras cau-  
1,8  
Estudios realizados en pediatría muestran que entre el 5 % sas  
y el 15 % de la población en edad escolar presenta proteinuria,  
.
Según la técnica utilizada y la proteinuria del paciente puede  
pero cuando estos niños son estudiados exhaustivamente requerirse la concentración previa de la orina. Hay que tener en  
solo el 0,1 % tiene proteinuria persistente. Una vez confirma- cuenta que durante este proceso se pueden perder proteínas  
da la proteinuria es necesario determinar donde se localiza el de bajo peso molecular, lo que llevaría a un resultado erróneo.  
5,6  
daño renal para realizar un adecuado tratamiento  
.
Los tipos de proteinuria que se pueden observar en un  
El uroproteinograma es un método cualitativo que per- uroproteinograma son fisiológica, Glomerular, tubular, mix-  
mite, mediante una corrida electroforética, separar las pro- to y mielomatosa.  
teínas presentes en la orina. Es una herramienta muy rica  
La proteinuria glomerular de acuerdo a las proteínas pre-  
en cuanto a la información que ofrece sobre el funciona- sentes, puede clasificarse en tres tipos: alta selectividad,  
7
.
miento y posibles lesiones estructurales renales.  
Este método puede variar su sensibilidad cambiando los  
soportes de corrida y/o los colorantes utilizados. Los so-  
portes pueden ser acetato de celulosa, agarosa, agarosa de  
alta resolución, dodecilsulfato de sodio-Agarosa (SDS-Aga-  
rosa), dodecilsulfato de sodio- poliacrilamida (SDS-Page).  
Este último es utilizado por lo general en investigación y no  
en laboratorios de diagnostico y seguimiento.  
Tabla I. Variaciones metodológicas del uroprotei-  
nogama.  
Los colorantes posibles listados en orden creciente de  
sensibilidad son: Amido Schwartz, Violeta acido, Coomassie  
Blue y coloración con metales pesados como Plata y Oro  
(Tabla I). Dentro de las técnicas disponibles encontramos  
una diferencia fundamental en cuanto a la forma de separa-  
ción de las proteínas que puede ser por su carga eléctrica o  
por su peso molecular. Si la separación es por peso molecu-  
lar cada banda corresponde a una única proteína las cuales  
se ordenan de menor a mayor peso molecular dentro de la  
Agarosa-HR, Agarosa de alta resolución; Ag, plata; Au, oro  
PM, Peso Molecular; Amido S: Amido Schwartz  
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selectividad intermedia, y escasa selectividad.  
En el caso de proteinurias tubulares las proteínas presen- ente. Su detección se realiza por técnicas de inmunoensayo.  
tes tienen un peso molecular menor a 65000 daltons. Estas Los objetivos del presente trabajo fueron: 1) comparar  
son la b microglobulina, la proteína ligadora de retinol, la los tipos de proteinuria visualizados en los uroproteino-  
uria tubular. Es inestable a pH menor a 5,5 y temperatura ambi-  
10.  
2
lisozima, la a microglobulina. La presencia de cualquiera gramas, realizados en una población pediátrica, utilizando  
1
de éstas marca una proteinuria tubular. Hace unos años se dos métodos diferentes: soporte de agarosa con coloración  
incorporó el concepto de proteinuria tubular incompleta en de plata coloidal (agarosa-plata) y dodecil sulfato de sodio-  
el cual se encuentran presentes proteínas de peso molecu- agaros con coloración de violeta acido (SDS-agarosa),  
y
lar comprendido entre 30.000 y 65.000 Daltons y protein- evaluar cuales nos brindan mayor información sobre el  
uria tubular completa cuando aparecen proteínas de peso daño renal.  
9
.
molecular comprendido entre 10.000 y 65.000 Dalton  
2) Evaluar si el dosaje de b microglobulina es un método  
2
En la proteinuria mixta se observan proteínas presentes confirmatorio de la proteinuria tubular.  
cuando hay daño glomerular y tubular, con posible predo-  
minio de unas u otras.  
Materiales y métodos  
En la proteinuria mielomatosa se observan cadenas  
Se analizaron 38 muestras de orina de 24 horas sin con-  
livianas monoclonales. Este perfil no se encuentra en la po- centrar que llegaron al laboratorio central del hospital de  
blación pediátrica niños “Ricardo Gutiérrez” con pedido de uroproteinograma  
La b microglobulina es una proteína de bajo peso molecular durante un año.  
2
(11800 daltons) que es utilizada como marcador de protein-  
Tabla III. Patrones electroforéticos de las 38 muestras  
procesadas.  
Tabla II. Características comparativas los dos métodos.  
SDS Agarosa, Dodecilsulfato de sodio-Agarosa; PF, Protein-  
uria Fisiologica; PGAS, Proteinuria Glomerular de alta selec-  
tividad; PGSI, Proteinuria glomerular de selectividad inter-  
Ag, Plata; SDS, Dodecilsulfato de sodio; PM, Peso Molecular. media; PGES, Proteinuria glomerular de escasa selectividad;  
PM, Proteinuria Mixta; PT, Proteinuria tubular.  
Figura 1. Bandas proteicas según método de separación.  
Separación por carga  
Separación por peso molecular  
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Para dicho análisis se emplearon dos técnicas. Primera  
Cuando las proteínas fueron separadas según su peso  
técnica: agarosa-plata para la cual se utilizó n kit comercial molecular encontramos mayor prevalencia de patrones fi-  
Titan gel Silver Stain de la línea Helena Laboratorios, que se siológicos, tubulares y mixtos y una menor prevalencia de  
realizó en forma manual.  
patrones glomerulares (Tabla III y fig. 2).  
El dosaje de b microglobulina resulto elevado en 12 (44  
Segunda técnica: SDS-agarosa , que se efectuó con un kit  
2
comercial Hidragel 5 Proteinurie de la empresa Sebia. El colo- %) de las 27 muestras analizadas (Valor de referencia < 157  
rante empleado fue violeta acido; Utilizando un equipo Hydra- mg/ l).De estas 8 (67 %) presentaban patrón tubular o mixto  
sys Focusing – Sebia en forma semiautomatizada (Tabla II). utilizando agarosa – plata, 12 (100 %) presentaban estos  
El análisis de los resultados fue realizado por el mismo patrones usando SDS-agarosa. En las 15 muestras con va-  
personal idóneo en las dos técnicas.  
lores de b microglobulina dentro del rango de referencia el  
2
El dosaje de b microglobulina se realizó en 27 de las 38 100% se asoció a proteinuria fisiológica o glomerular con la  
2
muestras recibidas, en un equipo Axsym System (Abbott) técnica de agarosa - plata, pero sólo 12 (80 %) se asociaron  
con un kit de enzimoinmunoensayo de micro partículas a estas proteinurias cuando se utilizó SDS-agarosa y 3 (20  
(MEIA) de la misma empresa.  
%) a proteinuria tubular o mixta (Tabla IV).  
Resultados  
En las 38 muestras procesadas se encontraron patrones  
Discusión  
La técnica de agarosa con coloración de plata es un pro-  
electroforéticos correspondientes a proteinurias fisiológi- ceso manual con un tiempo de coloración según el inserto  
cas, glomerulares (alta, media y baja selectividad), tubula- de alrededor de 3- 5 minutos, hasta la aparición de bandas.  
res y mixtas.  
Esto conlleva en algunos casos a una sobre coloración que  
Al analizar en forma comparativa los patrones electro- provoca una interpretación errónea de los resultados clasifi-  
foréticos hemos visto, en algunos casos, discrepancia entre cando como proteinurias glomerulares a proteinurias que  
los métodos utilizados.  
son fisiológicas.  
Tabla IV. Valoración de microglobulina.  
2
microglobulina Aumentada n= 12  
microglobulina Normal n=15  
2
2
tubular o  
mixta  
Tipo de proteinuria  
Glomerular o Fisiologica tubular o mixta  
Glomerular o Fisiologica  
AGAROSA-PLATA  
SDS-AGAROSA  
8 (67%)  
4 (33%)  
0
0
15 (100%)  
12 (80%)  
12 (100%)  
3 (20%)  
Figura 2. Resultados.  
SDS Agarosa, Dodesilsulfato de sodio-Agarosa; PF, Proteinuria fisiológica; PGAS, Proteinuria glomerular de alta sensibilidad;  
PGSI, Proteinuria glomerular de sensibilidad intermedia; PGES, Proteinuria glomerular de escasa sensibilidad; PM, Protein-  
uria mixta; PT, Proteinuria tubular  
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En esta técnica la proteína marcadora de daño tubu- confirmatorio de la tubulopatía, ya que en un 20 % de las  
lar es la b microglobulina y ocasionalmente aparecen la muestras obtuvimos valores normales por presentar tubu-  
2
transtiretrina y/o lisozima.  
La falta de asociación encontrada entre el dosaje de b mi-  
lopatías incompletas (presencia de a microglobulina).  
1
2
croglobulina elevado con proteinuria tubular o mixta con la Referencias bibliográficas  
técnica de agarosa - plata, podría explicarse por la mayor 1. Alegre J, Alles A, Angerosa M, Bianchi ME, Dorado E, Et-  
sensibilidad de la técnica inmunológica y/ o por la inestabili-  
chegoyen MC, Fayad A, Greloni G, Inserra F, l Mazziotta  
D, Pennacchiotti G, Rosa Diez G, Torales S, Torres ML,  
Varela F, Villagra A. Documento de Consenso, Implican-  
cia de la Proteinuria en el Diagnóstico y Seguimiento  
de la Enfermedad Renal Crónica. ABA-FBA-CUBRA-  
SAN30082013.pdf  
dad de la b microglobulina. Por el método MEIA se detectaron  
2
valores por encima del rango de referencia, que por su sensi-  
11  
bilidad no llegaron a detectarse en la corrida electroforética.  
Utilizando la técnica de SDS-Agarosa se observó un au-  
mento de los perfiles fisiológicos, tubulares y mixtos. El  
caso de los dos últimos perfiles, podría explicarse por la 2. Escalante-Gómez C, Zeledón-Sánchez F, Ulate-Montero  
detección de un mayor número de proteínas de bajo peso  
molecular (b microglobulina, Proteína ligadora de retinol,  
G. Proteinuria, fisiología y fisiopatología aplicada. Acta  
Médica Costarricense.2007;49/2:83-89  
2
Lisozima, a microglobulina y cadenas livianas) cuando 3. Le Carrer D y Boucraut J. La orina, electroforesis de pro-  
1
se utiliza esta técnica. La presencia de cualquiera de ellas  
teínas y la inmunofijación: Illustrated Interpretaciones.  
marcaría una proteinuria tubular o mixta.  
sebia. En:Hartier Diffusion ed. Paris: LEC,1994  
Otros autores demostraron que a mayor número de pro- 4. Osatinsky R. Proteinuria. Bioquimica y Patologia Clini-  
teínas marcadoras de daño tubular se obtiene una mejor ca.1993; 57:25-30  
clasificación de las proteinurias y si una de las proteínas es 5. Verocay Murell MC, Rebori Gilene A, Velasco Suárez.  
1
0.12  
la a microglobulina mejoraban mucho los resultados.  
Significado de la Proteinuria en el niño y adolescente.  
1
Esto justifica los casos en los cuales la b microglobulina  
Arch. med. interna (Montevideo) 2012;34(1):12-16  
2
mostro valores normales y el patrón electroforético marcó 6. Govantes JM y Sánchez Moreno A. Proteinuria. Asocia-  
proteinuria tubular utilizando SDS-agarosa.  
ción Española de Pediatría http://www.aeped.es/sites/  
La disminución del patrón glomerular empleando esta  
default/files/documentos 13-3.pdf  
técnica se debe en parte a una reclasificación del perfil a 7. Tomlinson PA. Low molecular weight proteins in chil-  
proteinuria fisiológica. Esto se explica por una sobrecolor-  
ación utilizando la técnica agarosa-plata.  
dren with renal disease.. Pediatr Nephrol. 1992;  
Nov;6(6):565-71.  
Por otra parte proteinurias glomerulares se reclasificaron 8. Madalena l, Pandolfo M, Facio ML, Garlatti C, Alejandre  
como tubulares y mixtas por la detección de proteínas de  
M, Bresciani P, Angerosa M, Pizzolato M. Proteinuria:  
lesión estructural renal y comparación de métodos.  
Acta Bioquím Clín Latinoam 2013; 47 (1): 85-93  
bajo peso molecular distintas de la b microglobulina suma-  
2
das a la disminución de la coloración de la albumina.  
Cuando se utilizó SDS-agarosa un 20 % de los pacientes 9. Siede WH , Regeniter A. Proteinuria – Diagnóstico e Inter-  
mostró proteinuria tubular o mixta con valores normales de  
b2microglobulina. Esto se explica por la presencia de otras  
proteínas de bajo peso molecular.  
pretación Mediante Proteínas Marcadoras. http://www.  
newscientific.com/wp-content/uploads/2013/11/CCa-  
ro_Proteinuria_ES_040601.pdf.  
Al realizar esta técnica visualizamos un número mayor 10. Tomlinson PA, Dalton RN, Hartley B, Haycock  
de microproteínas, lo que facilita la clasificación de pa-  
trones tubulares y mixtos.  
GB, Chantler C. Low molecular weight protein excretion  
in glomerular disease: a comparative analysis. Pediatr  
Nephrol. 1997 Jun;11(3):285-90.  
La disposición de las proteínas dentro de la corrida elec-  
troforética hace que la interpretación de los resultados sea 11. Facio M, Madalena L, Bresciani P, Pandolfo M, Kairúz A,  
más sencilla. La automatización la convierte en una técnica  
fácilmente estandarizable y reproducible.  
Alejandre ME, Fraind S, Angerosa M, Pizzolato M. Evalu-  
ación del perfil tubular renal mediante electroforesis en  
gel de poliacrilamida. Acta Bioquím Clín Latinoam 2006;  
40 (3): 383-90  
Por los resultados obtenidos observamos que por esta  
técnica se tiene una mejor correlación con el daño renal que  
empleando la técnica de separación por carga eléctrica.  
Debemos aclarar que al trabajar con población pediátrica  
estas muestras están exentas de proteinuria mielomatosa  
por la cual deberían hacerse trabajos para evaluar la utilidad  
de la técnica en adultos.  
El SDS-agarosa resultó ser una herramienta fundamental  
para el diagnóstico de las proteinurias en especial de las tu-  
bulares, pudiendo diferenciar entre completas e incompletas.  
12. Madalena L, Facio ML, Bresciani P, Fraind SA, Alejandre  
ME, Pandolfo M, Angerosa M, Toblli JE, Pizzolato M. Ex-  
creción de proteínas de bajo peso molecular en pacien-  
tes con proteinuria a cadena liviana como marcadoras  
de disfunción renal. Acta Bioquím Clín Latinoam 2004;  
38 (1): 17-22  
El dosaje de b microglobulina no resultó ser un método  
2
ByPC 2015;79(1):16-20